Impacts of bisphosphonates on the bone and its surrounding tissues

Bisfosfoniany są szeroko stosowane jako środki przeciwresorpcyjne do leczenia różnych chorób kości i stawów, w tym zaawansowanej osteoporozy, szpiczaka mnogiego, nowotworów z przerzutami do kości, choroby Pageta kości i reumatoidalnego zapalenia stawów. Bisfosfoniany działają jako antyosteoklasty poprzez indukcję apoptozy osteoklastów, co powoduje zmniejszenie tempa resorpcji kości. Niestety, istnieje wiele dowodów na to, że długotrwałe stosowanie bisfosfonianów wiąże się z martwicą kości.

Patogeneza martwicy kości obejmuje śmierć osteoblastów, osteoklastów i osteocytów. Ponadto funkcje komórek śródbłonka, komórek nabłonkowych i fibroblastów są upośledzone w martwicy kości, co prowadzi do zaburzającej angiogenezy i opóźnionego gojenia się ran. Martwica kości jest najczęściej stwierdzana w kości szczęki, a określenie związanej z lekami martwicy kości szczęki (MRONJ) stało się stanem o największym znaczeniu klinicznym wśród pacjentów otrzymujących bisfosfoniany. Chociaż leczenie chirurgiczne jest skuteczną strategią leczenia MRONJ, zbadano również kilka niechirurgicznych interwencji mających na celu osłabienie MRONJ.

Mając na celu pogłębienie wiedzy na temat MRONJ, postanowiliśmy podsumować i omówić holistyczny wpływ bisfosfonianów na kość i otaczające ją tkanki.

Ponadto omówiono i omówiono niechirurgiczne interwencje mające na celu osłabienie martwicy kości wywołanej bisfosfonianami.

  • Jednym z powikłań endoskopowego rozwarstwienia podśluzówkowego przełyku (ESD) jest pooperacyjne tworzenie się zwężenia. Powstawanie zwężenia jest związane ze stanem zapalnym i zwłóknieniem w procesie gojenia.
  • Postawiliśmy hipotezę, że stopień uszkodzeń termicznych spowodowanych przez urządzenie jest związany z powstawaniem zwężeń.
  • Naszym celem było ujawnienie związku między uszkodzeniem termicznym a wartością nastawczą urządzenia. Po resekcji przełyku świńskiego podaliśmy energię za pomocą urządzenia ESD (Flush Knife 1.5). Wykonaliśmy 10 punktów zasilania przez 1 s, 3 s i 5 s przy czterech nastawach urządzenia.
  • Zmierzyliśmy ilość prądu płynącego do przewodzących punktów oraz temperaturę i oceniliśmy patologicznie skutki uszkodzeń termicznych. W rezultacie średnie najwyższe temperatury przez 1 s to I (SWIFT Efekt3, Wat20): 61,19°C, II (SWIFT Efekt3, Wat30): 77,28 °C, III (SWIFT Efekt4 Wat20): 94,50 °C i IV (SWIFT Efekt4 Wat30) ): 94,29°C.
  • Średnie pola denaturacji cieplnej wynosiły I: 0,84 mm 2 , II: 1,00 mm 2 , III: 1,91 mm 2 , IV: 1,54 mm 2 . Średnia najwyższa temperatura i średnia powierzchnia denaturacji cieplnej były istotnie skorelowane (P < 0,001). Podsumowując, niskoprądowe wyładowania elektrostatyczne mogą tłumić rzeczywistą temperaturę i uszkodzenia termiczne w ranie ESD.
  • Sarkoidoza jest wieloukładową, zapalną chorobą ziarniniakową, która rzadko obejmuje tkankę piersi. Patofizjologia tej przewlekłej choroby ziarniniakowej nie jest dobrze poznana, ale uważa się, że jest wieloczynnikowa, obejmująca wpływy środowiskowe powodujące wzmocnioną odpowiedź immunologiczną.
  • Kluczową cechą histomorfologiczną w sarkoidozie jest obecność niemartwiczych ziarniniaków. W tym przypadku opisujemy 41-letniego Afroamerykanina ze znaną historią sarkoidozy płuc, u którego wystąpiła ginekomastia i obustronna tkliwość piersi z wyczuwalnymi guzkami.
  • W dalszej biopsji i badaniu mikroskopowym guzków piersi stwierdzono rozlane zajęcie ziarniniaków niemartwiczych w obu piersiach. Ostateczną diagnozę rozległej sarkoidozy obejmującej tkankę piersi postawiono po wykluczeniu innych przyczyn ziarniniaków niemartwiczych.
  • Pacjentka przeszła obustronną mastektomię w celu usunięcia guzków piersi. Ten przypadek omawia sarkoidozę z nietypowym miejscem. Enteroidy pochodzące z ludzkiej tkanki jelitowej (HIE; zwane również organoidami) są potężnym modelem ex vivo do badań żołądkowo-jelitowych.

Modyfikacja genetyczna tych nieprzekształconych kultur umożliwia nowy wgląd w funkcje genów i procesy biologiczne związane z chorobami jelit, a także funkcje specyficzne dla przewodu pokarmowego i segmentu dawcy.

W tym miejscu przedstawiamy szczegółowy rurociąg techniczny i protokół wykorzystania systemu edycji genomu CRISPR-Cas9 do wyłączenia interesującego genu w szczególności w HIE poprzez transdukcję lentiwirusową i klonowanie pojedynczych komórek. Protokół ten różni się od wcześniej opublikowanej alternatywy wykorzystującej elektroporację ludzkich kolonioidów do dostarczania transpozonów typu „piggyback” lub konstruktów CRISPR-Cas9, ponieważ protokół ten wykorzystuje zmodyfikowany, zfuzowany mały kierujący RNA LentiCRISPRv2 do ekspresji Cas9 i małego kierującego RNA w lentiwirusie.

 

Protokół obejmuje również etapy dostarczania genów i późniejsze klonowanie pojedynczych komórek komórek z nokautem, jak również weryfikację klonów i identyfikację sekwencji miejsc mutacji w celu ustanowienia klonów z nokautem.Przedstawiono ogólny schemat blokowy, wskazówki krok po kroku i sugestie dotyczące rozwiązywania problemów, aby pomóc badaczowi w uzyskaniu genetycznej linii HIE z nokautem w ciągu 2-3 miesięcy. W tym protokole dalej opisujemy, jak stosować HIE jako model ex vivo do oceny czynników restrykcyjnych gospodarza dla replikacji wirusa (na przykładzie replikacji ludzkiego norowirusa) przez nokautowanie czynników przyłączania gospodarza lub genów odporności wrodzonej. Omówiono inne zastosowania w celu poszerzenia użyteczności tego systemu, na przykład do generowania linii typu knockin lub warunkowego knockout HIE w celu zbadania funkcji niezbędnych genów w wielu procesach biologicznych, w tym w innych typach organoidów.

Inżynieria tkankowa in situ (TE) to podejście, które wykorzystuje bioresorbowalne przeszczepy w celu wywołania endogennej regeneracji uszkodzonych naczyń krwionośnych. Ocena nowo opracowanych przeszczepów naczyniowych TE in situ w dużej mierze opiera się na doświadczeniach na zwierzętach. Nie zdefiniowano jednak żadnego standardu dla modeli in vivo ani projektu badania, co utrudnia porównania między badaniami i wydajność translacji.

Aby dostarczyć danych wejściowych do sformułowania takiego standardu, celem tego badania było zmapowanie wszystkich doświadczeń na zwierzętach pod kątem TE naczyniowych in situ przy użyciu dostępnych z półki, resorbowalnych syntetycznych przeszczepów naczyniowych. Przeszukanie literatury (PubMed, Embase) dało 15 896 badań, z których 182 badania spełniały kryteria włączenia (n = 5101 zwierząt). Raporty przedstawiały szeroką gamę projektów badań, modeli zwierzęcych i biomateriałów. Metaanaliza drożności przeszczepu z analizą podgrup pod kątem gatunku, wieku, płci, miejsca implantacji i czasu obserwacji wykazała różnice specyficzne dla modelu. Badanie to identyfikuje możliwości ulepszonego projektowania i raportowania doświadczeń na zwierzętach w celu zwiększenia wartości translacyjnej.

Wpływ układu odpornościowego i stanu zapalnego na homeostazę narządów i nisze komórek macierzystych tkanek przy braku inwazji patogenów od dawna stanowi zagadkę w dziedzinie medycyny regeneracyjnej.

Paradoksalna rola składników immunologicznych w promowaniu uszkodzenia tkanek, a także rozwiązywaniu uszkodzeń tkanek, komplikuje terapeutyczne ukierunkowanie zapalenia jako środka do osiągnięcia homeostazy tkanek w kontekście choroby zwyrodnieniowej. Problem ten można rozwiązać za pomocą zintegrowanej, złożonej oceny zależności między komponentami zapalnymi a czynnikami mikro- i makrośrodowiskowymi występującymi w tkankach podczas zdrowia i choroby.

Rozważne decyzje dotyczące losu komórek macierzystych i ich zróżnicowanego potomstwa mają kluczowe znaczenie dla zachowania integralności i funkcji tkanek. Komórki macierzyste muszą dokonać tego wyboru losu w porozumieniu z innymi składnikami tkanki. Pod tym względem tkankowe komponenty odpornościowe, cząsteczki wykrywające niebezpieczeństwo/uszkodzenie kierujące sterylnymi kaskadami sygnalizacji zapalnej i komórki barierowe pełniące funkcje nadzoru immunologicznego odgrywają kluczową rolę w nadzorowaniu decyzji komórek macierzystych w ich niszach. Komórki macierzyste uczą się na podstawie wcześniejszych uszkodzeń, zarówno endogennych, jak i egzogennych, albo dostosowują się do trwałych zmian mikrośrodowiskowych, aby koordynować swoje decyzje.

Zatem zrozumienie sieci komunikacyjnych między komórkami macierzystymi a elementami układu odpornościowego jest niezbędne do zrozumienia decyzji podejmowanych przez komórki macierzyste w endogennych niszach tkankowych. Ponadto interakcje ogólnoustrojowe między niszami tkankowymi zintegrowanymi przez sieci odpornościowe służą jako systemy patrolujące do ustanawiania połączeń komunikacyjnych i organizowania ekologii mikroimmunologicznych w celu lepszej odpowiedzi organizmu na urazy i promowania regeneracji. Zrozumienie tych połączeń komunikacyjnych jest kluczem do opracowania immunocentrycznych terapii regeneracyjnych.

Tissue-Tek

abx082403-118ml Abbexa 118 ml 276 EUR

Tissue Culture Plate, 12 Well

TCP20-12 Bio Basic 1 UNIT 64.18 EUR

Biopsy Coredish 12 Compartmen Empty

CON8150 Scientific Laboratory Supplies PK10 88.92 EUR

Gastroscope biopsy (ESD) tissue array

ST245 TissueArray each 114 EUR

Biopsy Coredish Lower GI Tract 12 Compartment Empty

CON8152 Scientific Laboratory Supplies PK10 88.92 EUR

99445-12 DCT 12 X 75MM

99445-12 CORNING 250/pk 80.4 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Benign)

12-303-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Benign)

12-303-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Abnormal)

12-305-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Abnormal)

12-305-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Individual Reaction Mix 12

G065-12 ABM 200 reactions 200.4 EUR

Cryobox for biopsy vial

DD64052 Scientific Laboratory Supplies PK12 156.18 EUR

Human 12-lipoxygenase,LOX-12 ELISA Kit

201-12-0949 SunredBio 96 tests 528 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Undiagnosed)

12-310-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Undiagnosed)

12-310-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Normal)

12-311-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Normal)

12-311-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Benign)

12-313-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Benign)

12-313-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Lipoma)

12-314-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Lipoma)

12-314-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Liposarcoma)

12-316-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Liposarcoma)

12-316-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Abnormal)

12-317-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Adipose-Abnormal)

12-317-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Matched Pair Tissue Slides - Bladder Tissue

12-600-MPPT ProSci 1 pack 241.8 EUR

Matched Pair Tissue Slides - Skin Tissue

12-700-MPPT ProSci 1 pack 241.8 EUR

Breast Tissue Lysate (Normal)

1710-12 ProSci 0.1 mg 260.7 EUR

Colon Tissue Lysate (Normal)

1715-12 ProSci 0.1 mg 260.7 EUR

Human Interleukin 12,IL-12/P70 ELISA KIT

201-12-0100 SunredBio 96 tests 528 EUR

Human Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA KIT

201-12-0101 SunredBio 96 tests 528 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Skeletal Muscle-Normal)

12-341-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Skeletal Muscle-Normal)

12-341-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Skeletal Muscle-Benign)

12-343-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Skeletal Muscle-Benign)

12-343-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Skeletal Muscle-malignant)

12-345-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Soft Tissue Tissue Slide (Skeletal Muscle-malignant)

12-345-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

TEK Antibody

1-CSB-PA041300 Cusabio
  • 380.40 EUR
  • 292.80 EUR
  • 100ul
  • 50ul

TEK Antibody

1-CSB-PA050236 Cusabio
  • 266.40 EUR
  • 234.00 EUR
  • 100ug
  • 50ug

TEK Antibody

1-CSB-PA050237 Cusabio
  • 266.40 EUR
  • 234.00 EUR
  • 100ug
  • 50ug

TEK Antibody

1-CSB-PA982820 Cusabio
  • 380.40 EUR
  • 292.80 EUR
  • 100ul
  • 50ul

TEK siRNA

20-abx936459 Abbexa
  • 661.20 EUR
  • 878.40 EUR
  • 15 nmol
  • 30 nmol

TEK Antibody

1-CSB-PA023375GA01HU Cusabio
  • 716.40 EUR
  • 399.60 EUR
  • 150ul
  • 50ul

TEK antibody

70R-20759 Fitzgerald 50 ul 522 EUR

TEK Antibody

37274-100ul SAB 100ul 302.4 EUR

anti-TEK

YF-PA27377 Abfrontier 50 ug 435.6 EUR

Aligned Nanofibers 12 Well Plate Inserts

3D00016-12 Neuromics 700 nm-PCLs 127.2 EUR

Simport Biopsy Embedding Cassette White

HIS0032 Scientific Laboratory Supplies PK1500 190.38 EUR

Simport Biopsy Embedding Cassette Pink

HIS0033 Scientific Laboratory Supplies PK1500 190.38 EUR

Simport Biopsy Embedding Cassette Green

HIS0034 Scientific Laboratory Supplies PK1500 190.38 EUR

Simport Biopsy Embedding Cassette Yellow

HIS0035 Scientific Laboratory Supplies PK1500 190.38 EUR

Simport Biopsy Embedding Cassette Blue

HIS0036 Scientific Laboratory Supplies PK1500 190.38 EUR

Simport Biopsy Embedding Cassette White

HIS0076 Scientific Laboratory Supplies PK1500 326.04 EUR

Simport Biopsy Embedding Cassette Pink

HIS0077 Scientific Laboratory Supplies PK1500 326.04 EUR

Simport Biopsy Embedding Cassette Green

HIS0078 Scientific Laboratory Supplies PK1500 326.04 EUR

Simport Biopsy Embedding Cassette Yellow

HIS0079 Scientific Laboratory Supplies PK1500 326.04 EUR

Simport Biopsy Embedding Cassette Blue

HIS0080 Scientific Laboratory Supplies PK1500 326.04 EUR

Simport Swingsette Biopsy Cassette White

HIS2000 Scientific Laboratory Supplies PK1500 313.5 EUR

Simport Swingsette Biopsy Cassette Pink

HIS2002 Scientific Laboratory Supplies PK1500 313.5 EUR

Simport Swingsette Biopsy Cassette Green

HIS2004 Scientific Laboratory Supplies PK1500 313.5 EUR

Simport Swingsette Biopsy Cassette Yellow

HIS2006 Scientific Laboratory Supplies PK1500 313.5 EUR

Biopsy Coredish 5 Compartment Empty

CON8156 Scientific Laboratory Supplies PK10 88.92 EUR

Biopsy Coredish 8 Compartment Empty

CON8160 Scientific Laboratory Supplies PK10 88.92 EUR

TISSUE CULTURE PLATE 12-WELL 6.80ML

ARG1486 Scientific Laboratory Supplies PK100 319.2 EUR

Human cysteinyl aspartate specific proteinases 12,Caspase-12 ELISA Kit

201-12-0763 SunredBio 96 tests 528 EUR

Penis Tissue Slide (Malignant)

12-204-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Penis Tissue Slide (Malignant)

12-204-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Gallbladder Tissue Slide (Normal)

12-401-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Gallbladder Tissue Slide (Normal)

12-401-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Gallbladder Tissue Slide (Benign)

12-403-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Gallbladder Tissue Slide (Benign)

12-403-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Gallbladder Tissue Slide (Abnormal)

12-417-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Gallbladder Tissue Slide (Abnormal)

12-417-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Bladder Tissue Slide (Normal)

12-601-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Bladder Tissue Slide (Normal)

12-601-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Skin Tissue Slide (Normal)

12-701-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Skin Tissue Slide (Normal)

12-701-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Skin Tissue Slide (Benign)

12-702-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Skin Tissue Slide (Benign)

12-702-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Skin Tissue Slide (Abnormal)

12-706-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Skin Tissue Slide (Abnormal)

12-706-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Cartilage Tissue Slide (Benign)

12-903-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Cartilage Tissue Slide (Benign)

12-903-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Bone Tissue Slide (Chondrosarcoma)

12-907-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Bone Tissue Slide (Chondrosarcoma)

12-907-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

Uvula Tissue Slide (Benign)

12-908-10um ProSci 10 um 241.8 EUR

Uvula Tissue Slide (Benign)

12-908-4um ProSci 4 um 216.6 EUR

TEK Rabbit pAb

A7222-100ul Abclonal 100 ul 369.6 EUR

TEK Rabbit pAb

A7222-200ul Abclonal 200 ul 550.8 EUR

TEK Rabbit pAb

A7222-20ul Abclonal 20 ul 219.6 EUR

TEK Rabbit pAb

A7222-50ul Abclonal 50 ul 267.6 EUR

TEK Conjugated Antibody

C37274 SAB 100ul 476.4 EUR

TEK Rabbit pAb

A0743-100ul Abclonal 100 ul 369.6 EUR

TEK Rabbit pAb

A0743-200ul Abclonal 200 ul 550.8 EUR

TEK Rabbit pAb

A0743-20ul Abclonal 20 ul 219.6 EUR

TEK Rabbit pAb

A0743-50ul Abclonal 50 ul 267.6 EUR

Anti-TEK antibody

STJ25807 St John's Laboratory 100 µl 332.4 EUR

Anti-TEK antibody

STJ29302 St John's Laboratory 100 µl 332.4 EUR

Anti-TEK Antibody

STJ503257 St John's Laboratory 100 µg 571.2 EUR

Anti-TEK Antibody

STJ503258 St John's Laboratory 100 µg 571.2 EUR

W związku z tym niniejszy przegląd stanowi zintegrowaną próbę przedstawienia ujednoliconego poglądu na to, w jaki sposób komórki zapalne i odpornościowe dostarczają wskazówek komórkom macierzystym do rzeźbienia tkanek podczas rozwoju, starzenia się organizmu i kryzysu tkankowego w oparciu o aktualną wiedzę w tej dziedzinie.