Ilościowe określenie poziomów białek transporterów leków we frakcji błony komórkowej pomaga w wyjaśnieniu funkcji tych transporterów. W tym badaniu przeprowadziliśmy ocenę proteomiczną wzbogaconych białek transporterowych związanych z lekiem we frakcji błony plazmatycznej przygotowanej z mysich tkanek wątroby i nerek przy użyciu zestawu Membrane Protein Extraction Kit i homogenizatora perełek.

Frakcje surowe i błonę plazmatyczną przygotowano przy użyciu homogenizatora Dounce lub kulek, a poziomy białka określono przy użyciu proteomiki ilościowej. W tkankach wątroby frakcje błony komórkowej były bardziej wzbogacone w białka transportowe niż surowe frakcje błony; średnie współczynniki wzbogacenia frakcji osocza do surowej membrany wynosiły 3,31 i 6,93 odpowiednio przy użyciu homogenizatorów Dounce i perełek.

Stężenia białek transporterowych we frakcjach błony komórkowej określone przy użyciu homogenizatora perełkowego były wyższe niż te określone przy użyciu homogenizatora Dounce.

• Natomiast w tkankach nerek frakcje błony plazmatycznej zostały wzbogacone w transportery zlokalizowane w błonie rąbka szczoteczkowego w takim samym stopniu dla obu homogenizatorów; jednakże frakcje błonowe otrzymane przy użyciu obu homogenizatorów nie były wzbogacone w Na+/K+-ATPazę i transportery zlokalizowane w błonie podstawno-bocznej.
• Wyniki te wskazują, że frakcjonowanie przy użyciu homogenizatora kulek dało wzbogacone w transporter frakcje błony plazmatycznej z tkanek wątroby i nerek myszy; jednakże nie zaobserwowano wzbogacenia w transportery podstawno-boczne we frakcjach błony plazmatycznej wytworzonych z tkanek nerki.
• Aktywowane osocze bogatopłytkowe (PRP) badano jako zamiennik płodowej surowicy bydlęcej (FBS) w hodowli komórek macierzystych. Jednak obecne metody są czasochłonne lub wymagają dodania substancji egzogennych w celu aktywacji PRP, co ma wady w zastosowaniach klinicznych.
• W tym badaniu opracowaliśmy nową metodę aktywacji PRP przy użyciu homogenizatora z młynem perełkowym i porównaliśmy ją z poprzednimi metodami aktywacji PRP. PRP przygotowano w dwuetapowym procesie wirowania i aktywowano przez wapń (Ca-PRP), cykle zamrażania-rozmrażania (FT-PRP) lub przetwarzanie homogenizatora w młynie perełkowym (BM-PRP). Ocena ilościowa czynników wzrostu w PRP ujawniła, że ​​wszystkie formy aktywowanego PRP uwalniały wyższe poziomy płytkopochodnego czynnika wzrostu AB i transformującego czynnika wzrostu β1 niż te w ubogim w płytki osoczu; jednak BM-PRP skutkował znacznie wyższymi poziomami czynników wzrostu niż te z Ca-PRP i FT-PRP.
• Następnie przeanalizowaliśmy zdolność różnych form PRP do stymulowania proliferacji, migracji i różnicowania mezenchymalnych komórek macierzystych pochodzących z krwi pępowinowej (UCB-MSC).
• Nasze wyniki wykazały, że BM-PRP znacznie zwiększył tempo proliferacji i migracji UCB-MSCs przy jednoczesnym zachowaniu właściwości fenotypowych i zdolności komórek macierzystych MSC. W związku z tym opracowana metoda może być odpowiednia do aktywacji PRP, a PRP aktywowany BM może być odpowiednim zamiennikiem FBS w hodowli komórek macierzystych.

Określono uwalnianie białka, rozkład wielkości cząstek i lepkość rozerwanych zawiesin E. coli z Dyno Mill KDL, Manton Gaulin 15 M-8TA i Microfluidizer M-110.

Zbadano również wpływ tych parametrów na oddzielanie resztek komórek od roztworu białka przez wirowanie i filtrację. Wszystkie trzy badane metody dezintegracji dają w przybliżeniu takie same uwalnianie białek i enzymów, ale znacznie różniące się właściwości fizyczne dezintegracji komórek, co ma wpływ na wirowanie i filtrację . Na stopień separacji biomasy podczas wirowania tylko w niewielkim stopniu wpływa rosnący stopień rozbicia (wzrost uwalniania białka) w młynie perełkowym, podczas gdy wzrost stopnia rozbicia w dwóch homogenizatorach wysokociśnieniowych drastycznie zmniejsza stopień separacji odśrodkowej.

Jednak wzrastający stopień rozdrobnienia powoduje skrócenie czasu filtracji podczas filtracji dla wszystkich trzech metod rozdrabniania. Wyniki pokazują ponadto, że stężenie komórek ma tylko niewielki wpływ na uwalnianie białka w homogenizatorze wysokociśnieniowym Microfluidizer, podczas gdy wzrost zawartości biomasy zmniejsza zdolność do rozdzielenia komórek zarówno podczas filtracji, jak i wirowania.

Najskuteczniejszym sposobem leczenia schyłkowej marskości wątroby jest przeszczep wątroby. Jednak ze względu na poważne niedobory dawców pilnie potrzebne są nowe terapie zastępujące przeszczep wątroby. Ostatnie badania koncentrowały się na nowatorskich metodach terapeutycznych wykorzystujących hepatocyty i indukowane pluripotencjalne komórki macierzyste, staramy się opracować metody przeszczepiania tych komórek na powierzchnię wątroby.

W niniejszym badaniu ocenialiśmy kilka metod pod kątem ich skuteczności w odklejaniu błony surowiczej pokrywającej powierzchnię wątroby do przeszczepu na powierzchnię wątroby.

Powierzchnię wątroby szczurów z niedoborem dipeptydylopeptydazy IV (DPPIV) w modelu marskości oddzielono różnymi metodami, a następnie przeszczepiono wątroby płodowe od szczurów DPPIV-dodatnich . Stwierdziliśmy, że szybkość wszczepienia i powierzchnia, a także czynność wątroby uległy poprawie u szczurów poddanych przeszczepowi po oderwaniu błony surowiczej za pomocą homogenizatora ultradźwiękowego, który naśladuje ultradźwiękowy aspirator chirurgiczny Cavitron (CUSA), w porównaniu z brakiem oddzielenia. Ponadto ilość krwawienia była mniejsza przy metodzie homogenizatora ultradźwiękowego niż przy metodzie igłowej i elektrycznej skalpela. Odkrycia te dostarczają dowodów na to, że przeszczep na powierzchnię wątroby z odwarstwieniem błony surowiczej przy użyciu CUSA może przyczynić się do opracowania nowych metod leczenia marskości wątroby przy użyciu komórek lub tkanek.

W niniejszym piśmie przedstawiono asymetryczny, dwukierunkowy system komunikacji w świetle widzialnym (B-VLC). Łączy homogenizatory wiązki z przestrzennym modulatorem światła (SLM) w celu wdrożenia technologii generowania orbitalnego momentu pędu (OAM) u użytkownika terminala do transmisji danych w górę.

Główną zaletą proponowanego podejścia jest to, że wiele trybów OAM może być arbitralnie generowanych jednocześnie przez jeden SLM. Wydajność transmisji łącza w górę można również znacznie poprawić poprzez multipleksowanie większej liczby wygenerowanych kanałów OAM. W celu weryfikacji koncepcji wdrożono asymetryczny B-VLC oparty na technologii generacji OAM do transmisji uplink na odległość prawie 2 m. W celu sprawdzenia wydajności transmisji zaimplementowano również schematy modulacji pasma podstawowego, w tym kluczowanie włącz-wyłącz (OOK) i kwadraturowe kluczowanie z przesunięciem fazowym.

BeadBug 6 Six Position Homogenizer 230V
HOM3018	Scientific Laboratory Supplies	EACH	2919.54 EUR
BeadBug 6, Six Position Homogenizer, 115V
D1036	Benchmark Scientific	1 each	2617.7 EUR
BeadBug Microtube homogenizer
SLS1402	Scientific Laboratory Supplies	EACH	1203.84 EUR
BeadBug™ Microtube homogenizer, 115V
D1030	Benchmark Scientific	1 each	980.8 EUR
BeadBug
D1030-E	Benchmark Scientific	1 PC	2244.3 EUR
BeadBug 6
D1036-E	Benchmark Scientific	1 PC	153.17 EUR
D1000 Homogenizer
D1000-E	Benchmark Scientific	1 PC	392.24 EUR
Beadbug Filled Tubes
Z763764-50EA	Scientific Laboratory Supplies	PK50	181.26 EUR
Homogenizer stand for Agile? Hand-held homogenizer
AHM1-VS	ACTGene	each	634.8 EUR
BeadBug Prefilled Tubes 2.0ml
Z763799-50EA	Scientific Laboratory Supplies	PK50	207.48 EUR
Microtube homogenizer, 115V
BCM1200	Bio Basic	1 pcs, 1 UNIT	11944.61 EUR
Microtube homogenizer, 115V
BCM1201	Bio Basic	1 pcs, 1 UNIT	1224.14 EUR
Dounce Tissue Homogenizer
1998-1	Biovision	each	470.4 EUR
Motic 3 Position Phase Slider
MIC2920	Scientific Laboratory Supplies	EACH	101.46 EUR
3 Position Truck -300Kg Capacity
TRO1222	Scientific Laboratory Supplies	EACH	201.78 EUR
BeadBlaster Microtube homogenizer 230V
HOM3012	Scientific Laboratory Supplies	EACH	10540.44 EUR
Pulse 150 Ultrasonic Homogenizer
HOM3082	Scientific Laboratory Supplies	EACH	3278.64 EUR
Micro Bead Sterlizer
B1201-E	Benchmark Scientific	1 PC	651.24 EUR
Micro Bead Sterlizer
B1202-E	Benchmark Scientific	1 PC	100.97 EUR
Refill Glass Beads
B1201-BEAD	Benchmark Scientific	1 PC	141.34 EUR
BeadBlaster™ Microtube homogenizer, 115V
D2400	Benchmark Scientific	1 each	9275.1 EUR
4 position Microplate Shaker
abx725017-1Unit	Abbexa	1 Unit	957.6 EUR
Round Rotor, 8 position
BCM1710	Bio Basic	1 pcs, 1 UNIT	125.08 EUR
Bangs Lab Bead Solution
SOLN1-1000	Bangs Laboratories	1000 ML	186.07 EUR
Bangs Lab Bead Solution
SOLN1-2000	Bangs Laboratories	2000 ML	255.24 EUR
Bangs Lab Bead Solution
SOLN1-500	Bangs Laboratories	500 ML	118.21 EUR
BeadBlaster 24 Refrigerated Microtube Homogenizer 230V
HOM3078	Scientific Laboratory Supplies	EACH	18927.42 EUR
Motic Phase Contrast 5 Position
MIC2940	Scientific Laboratory Supplies	EACH	533.52 EUR
8 position automatic cell changer
SPE4636	Scientific Laboratory Supplies	EACH	1503.66 EUR
Automatic 8 position cuvette holder
SPE4670	Scientific Laboratory Supplies	EACH	1487.7 EUR
BeadBlaster™ 24 Refrigerated Microtube Homogenizer, 115V
D2400-R	Benchmark Scientific	1 each	14802.1 EUR
BeadBlaster™ 24 Refrigerated Microtube Homogenizer, 230V
D2400-R-E	Benchmark Scientific	1 each	14802.1 EUR
CM Rapid Run Agarose Bead
CMRR-25	ABTBeads	25 ml	122.4 EUR
CM Rapid Run Agarose Bead
CMRR-300	ABTBeads	300 ml	590.4 EUR
DEAE Rapid Run Agarose Bead
DEAERR-25	ABTBeads	25 ml	122.4 EUR
DEAE Rapid Run Agarose Bead
DEAERR-300	ABTBeads	300 ml	590.4 EUR
Bead Sample Pack - 50mL Set
BSP-50B2	Next Advance	1pack	484.8 EUR
Bead Sample Pack - 5E Set
BSP-5E	Next Advance	1pack	302.4 EUR
Bead Sample Pack - 5M Set
BSP-5Y	Next Advance	1pack	289.2 EUR
Bead Sample Pack - Full Set
BSP-ALL2	Next Advance	1pack	460.8 EUR
Bead Sample Pack - Cell Cultures
BSP-CC2	Next Advance	1pack	234 EUR
Bead Sample Pack - Microcentrifuge Set
BSP-MC2	Next Advance	1pack	278.4 EUR
Bead Sample Pack - Organ Tissues
BSP-OT3	Next Advance	1pack	282 EUR
SP Rapid Run Agarose Bead
SPRR-25	ABTBeads	25 ml	122.4 EUR
SP Rapid Run Agarose Bead
SPRR-300	ABTBeads	300 ml	590.4 EUR
Glass bead diameter 1 mm
DD68499	Scientific Laboratory Supplies	EACH	26.68 EUR
Glass bead diameter 2 mm
DD68500	Scientific Laboratory Supplies	EACH	37.62 EUR
Glass bead diameter 3mm 500g
DD68501	Scientific Laboratory Supplies	EACH	39.9 EUR
Glass bead diameter 4 mm
DD68502	Scientific Laboratory Supplies	EACH	35.34 EUR
Glass bead diameter 5 mm
DD68503	Scientific Laboratory Supplies	EACH	37.62 EUR
Glass bead diameter 6 mm
DD68504	Scientific Laboratory Supplies	EACH	36.48 EUR
Glass bead diameter 8 mm
DD68505	Scientific Laboratory Supplies	BAG	42.64 EUR
Glass bead diameter 10 mm
DD68555	Scientific Laboratory Supplies	EACH	42.52 EUR
PIPET CONTROLLER - 2-POSITION CHARGING STAND
357490	CORNING	1/pk	76.8 EUR
5 position Shelf Pack for AUT4300
AUT4320	Scientific Laboratory Supplies	EACH	809.4 EUR
5 position Shelf Pack for AUT4220
AUT4324	Scientific Laboratory Supplies	EACH	882.36 EUR
5 position Shelf Pack for AUT4304
AUT4328	Scientific Laboratory Supplies	EACH	913.14 EUR
Flowgen Digital Dry Bath Single Position
BLO2250	Scientific Laboratory Supplies	EACH	624.72 EUR
Flowgen Digital Dry Bath Dual Position
BLO2252	Scientific Laboratory Supplies	EACH	779.76 EUR
Kinesis PCB for TitanHT 10 Position
CHR2895	Scientific Laboratory Supplies	EACH	278.16 EUR
Kinesis PCB for TitanHT 6 Position
CHR2897	Scientific Laboratory Supplies	EACH	278.16 EUR
Kinesis Position Sensing Switch; 7725i / 9010i
CHR2927	Scientific Laboratory Supplies	EACH	57 EUR
Benchmark StripSpin Round Rotor 8 position
CEN1715	Scientific Laboratory Supplies	EACH	63.84 EUR
Kinesis Vial Rack; 12x32mm; 50 Position
CHR1027	Scientific Laboratory Supplies	EACH	27.41 EUR
D1000 Homogenizer incl 5mm and 7mm generators 230V
HOM3064	Scientific Laboratory Supplies	EACH	1422.72 EUR
Recombinant Transmembrane Protease Serine 2 Protein, Partial
E80016	EpiGentek	470.80 EUR 753.50 EUR 1824.90 EUR	20 ul 100 ul 500 ul
Recombinant TMPRSS2 Protein, Partial
E80017	EpiGentek	423.50 EUR 660.00 EUR 2321.00 EUR	20 ul 100 ul 1 ml
Recombinant Novel Coronavirus Spike Glycoprotein(S), Partial
E80018	EpiGentek	388.30 EUR 860.20 EUR 4888.40 EUR	20 ul 100 ul 1 ml
Anti-DDK(FLAG) Agarose bead Conjugated
D4501-001	GenDepot	1ml	660 EUR
Anti-DDK(FLAG) Agarose bead Conjugated
D4501-005	GenDepot	5ml	1647.6 EUR
RNA/DNA Purification Kit (Magnetic Bead)
DA0623	Daan Gene	32 test/kit	Ask for price
Nickel NTA Magnetic Agarose Bead (5%)
MagNTANi5-10	ABTBeads	10ml suspension	340.8 EUR
Nickel NTA Magnetic Agarose Bead (5%)
MagNTANi5-2	ABTBeads	2ml suspension	118.8 EUR
Nickel NTA Magnetic Agarose Bead (5%)
MagNTANi5-5	ABTBeads	5ml suspension	208.8 EUR
2ml tube, reinforced, with screw cap, skirted (not for BeadBug 3), pk/600
D1031-RFS	Benchmark Scientific	1 each	314.9 EUR
3-aminobenzamide
79888-3	BPS Bioscience	5 g	250 EUR
Anti-14-3-3 alpha + beta Rabbit Monoclonal Antibody
M02431-3	BosterBio	100ug/vial	476.4 EUR
IL-3 Interleukin-3 Human Recombinant Protein, His Tag
PROTP08700-3	BosterBio	Regular: 50ug	380.4 EUR
Individual Reaction Mix 3
G065-3	ABM	200 reactions	200.4 EUR
3-D Life Thioglycerol
T10-3	Cellendes	180 µl	57.6 EUR
Organic Wine Standard 3
WINE-3	Scientific Laboratory Supplies	1ML	258.78 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 4.5
BUFF1-1000	Bangs Laboratories	1000 ML	186.07 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 4.5
BUFF1-2000	Bangs Laboratories	2000 ML	255.24 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 4.5
BUFF1-250	Bangs Laboratories	250 ML	105.17 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 4.5
BUFF1-500	Bangs Laboratories	500 ML	144.31 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 6.0
BUFF2-1000	Bangs Laboratories	1000 ML	186.07 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 6.0
BUFF2-2000	Bangs Laboratories	2000 ML	255.24 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 6.0
BUFF2-250	Bangs Laboratories	250 ML	105.17 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 6.0
BUFF2-500	Bangs Laboratories	500 ML	144.31 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 7.4
BUFF3-1000	Bangs Laboratories	1000 ML	186.07 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 7.4
BUFF3-2000	Bangs Laboratories	2000 ML	255.24 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 7.4
BUFF3-250	Bangs Laboratories	250 ML	105.17 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 7.4
BUFF3-500	Bangs Laboratories	500 ML	144.31 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 9.0
BUFF4-1000	Bangs Laboratories	1000 ML	186.07 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 9.0
BUFF4-2000	Bangs Laboratories	2000 ML	255.24 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 9.0
BUFF4-250	Bangs Laboratories	250 ML	105.17 EUR
Bangs Lab Bead Coupling Buffer, pH 9.0
BUFF4-500	Bangs Laboratories	500 ML	144.31 EUR
Bangs Lab Bead Storage Buffer, pH 7.4
BUFF5-1000	Bangs Laboratories	1000 ML	186.07 EUR
Bangs Lab Bead Storage Buffer, pH 7.4
BUFF5-2000	Bangs Laboratories	2000 ML	255.24 EUR
Bangs Lab Bead Storage Buffer, pH 7.4
BUFF5-250	Bangs Laboratories	250 ML	105.17 EUR

Wyniki eksperymentalne pokazują, że przy użyciu  wiązki S -polaryzacyjnej można uzyskać przepustowość łącza w dół do 2,2 Gbit/s. Dla porównania, zdolność transmisji łącza w górę można również znacznie zwiększyć, stosując  polaryzację P poprzez multipleksowanie czterech kanałów OAM, każdy z maksymalną szybkością transmisji do 800 Mbit/s. ^{Wszystkie bitowe stopy błędów ( BER} ) zarówno transmisji w górę, jak i w dół były poniżej limitu korekcji błędów w przód ( BER = 3×10-3 ) .